X
Код презентации скопируйте его
Различные типы ФКУ и методы их молекулярной диагностики
Скачать эту презентацию
Презентация на тему Различные типы ФКУ и методы их молекулярной диагностики
Скачать эту презентациюCлайд 1
Различные типы ФКУ и методы их молекулярной диагностики.
Cлайд 2
Фенилкетонурия – частое врожденное нарушение метаболизма аминокислот, в основе которого лежит дефицит печеночного фермента фенилаланингидроксилазы, осуществляющего превращение фенилаланина. Основным клиническим симптомом фенилкетонурии, без своевременного начатого лечения, является задержка психо-речевого и физического развития и, как следствие, слабоумие, ведущее к тяжелой психической инвалидности.
Cлайд 3
Распространенность ФКУ в различных популяциях мира, по данным массового скрининга
Cлайд 4
ФЕНИЛКЕТОНУРИЯ Классическая Повреждении в гене фенилаланингидроксилазы (PAH) 98% Атипичная Повреждения в генах синтеза и обмена тетрогидробиоптерина (ВН4) (PTS, QDPR и др.) 2%
Cлайд 5
Cлайд 6
Частота встречаемости наиболее частых мутаций среди больных в мире (http://data.mch.mcgill.ca/pahdb) в Европейских популяциях (Zschocke J., 2003 ) 42% 63%
Cлайд 7
Система регистрации наиболее частых мутаций А) одна пара праймеров и две эндонуклеазы рестрикции Б) две пары праймеров и одна эндонуклеаза рестрикции
Cлайд 8
Структура выборки (N=302) Воронежская область 46 человек Свердловская область 33 человека Самарская область 23 человека Курская область 23 человека Вологодская область 20 человек Архангельская область 24 человека Удмуртия 28 человек Московская область 47 человек Пациенты научно-консультативного отделение ГУ МГНЦ РАМН 58 человек
Cлайд 9
Частота встречаемости наиболее частых мутаций в Российских популяциях 79,1%
Cлайд 10
Частота распространения наиболее частых мутаций в мире, в Европейских популяциях и в исследуемых российских популяциях больных ФКУ
Cлайд 11
. Фрагмент сиквенса экзона 7 гена РАН, образца ДНК больного ФКУ из Воронежской области. Замена G на Т в 781 основании гена РАН приводящая к преждевременному стоп кодону в 261 кодоне (Arg261Stop). Стрелкой обозначена мутация R261X. SSCP-анализ экзона 7 гена PAH Стрелкой обозначено изменение электрофоретической Подвижности соответствующее мутации R261X.
Cлайд 12
Структура гена PAH и локализация обнаруженных мутаций в гене PAH Суммарная информативность 87,2%
Cлайд 13
Полиморфные маркеры внутри и непосредственной близости от гена PAH 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 STR VNTR PAH 26 STR 76kb VNTR STR PAH 26 STR Гетерозиготность 75% Гетерозиготность 72% Гетерозиготность 70%
Cлайд 14
Исследование в гене PAH Количество человек Обнаружены обе мутации в гене PAH 233 Обнаружены одна мутация в гене PAH 58 Мутаций в гене PAH не обнаружены 11
Cлайд 15
Синтез и метаболизм тетрагидробиоптерина
Cлайд 16
Ген QDPR локализован на хромосоме 4 в районе p15.3 Ген PTS расположен хромосоме 11 в районе q22.3-23.3 PTS GCH1 PCBD QDPR
Cлайд 17
AGT TAG 2,7kb 1,9kb 10kb 2,5kb 1,7kb экзон 1 экзон 2 экзон 3 экзон 4 экзон 5 экзон 6 A135D экзон 7 2,7kb Структура гена QDPR и локализация обнаруженных мутаций в гене QDPR
Cлайд 18
Структура и локализация обнаруженных мутаций в гене PTS 2,0kb 1,5kb 0,4kb 2,5kb 0,2kb экзон 1 экзон 2 экзон 3 экзон 4 экзон 5 экзон 6 AGT TAG N72K V59G S32G IVS5-1g>a T106M g.7068G>A
Cлайд 19
Мутация Кол-во хромосом Ген Экзон/ Интрон Информат. A135D 2 QDPR Экзон 4 41,6% N72K 2 PTS Экзон 4 T106M 2 PTS Экзон 6 S32G 1 PTS Экзон 2 V59G 1 PTS Экзон 3 IVS5-1g>a 1 PTS Интрон 5 g.7068G>A 1 PTS Экзон 6
Cлайд 20
Больной ВН4-зависимой формой ГФА Диета с пониженным содержанием ФА Умственная отсталость и тяжелые неврологические нарушения Комбинированное лечение диета с пониженным содержанием ФА медиаторы ВН4 Отсутствие неврологической симптоматики
Cлайд 21
Практическое применение С помощью разработанной системы регистрации наиболее частых мутаций в гене PAH проведено: 216 диагностики гетерозиготного носительства мутаций в гене PAH: 162 диагностики провели для индивидов, не имеющих в семье больного ФКУ (планирование беременности):обнаружено 4 гетерозиготных носителя мутаций в гене PAH 54 диагностики в семьях больных ФКУ: обнаружено 26 гетерозиготных носителя мутаций в гене PAH 67 пренатальных диагностик, из них: В семи случаях плод унаследовал те же хромосомы, что и больной ребенок В 46 случае плод являлся гетерозиготным носителем заболевания В 14 случаях плод не унаследовал мутации в гене PAH
Cлайд 22
Практическое применение
Cлайд 23
Повышенный уровень ФА, клинические проявления ГФА Молекулярно-генетическое исследование гена PAH с помощью системы обнаружения наиболее частых мутаций Обнаружены обе мутации в гене PAH Обнаружена одна мутация в гене PAH Мутаций в гене PAH не обнаружено Косвенная диагностика с использованием полиморфных маркеров, расположенных внутри и непосредственной близости от гена PAH SSCP-анализ всей кодирующей последовательности гена PAH и областей интрон-экзонных соединений Обнаружены обе мутации в гене PAH Обнаружена одна мутация в гене PAH Мутаций не обнаружено SSCP-анализ всей кодирующей последовательности и областей интрон-экзонных соединений генов PTS и QDPR Семья информативна, возможно проведение пренатальной диагностики и выявление гетерозиготных носителей среди родственников Схема молекулярно-генетической диагностики гиперфенилаланинемии 69,2% 100%
