Коклюш - инфекционное заболевание, передающееся воздушно-капельным путем. До настоящего времени коклюш и его возбудитель остаются серьезной проблемой не только для России, но и для всего мира. По данным ВОЗ, в мире ежегодно заболевает коклюшем около 60 млн человек, умирает около 1 млн детей, преимущественно в возрасте до одного года.
Cлайд 3
Внешний вид ребенка, больного коклюшем, во время спазматического приступа
Cлайд 4
Род BORDETELLA Вид BORDETELLA PERTUSSIS
Cлайд 5
Морфология Мелкая, овоидная, грам- палочка с закругленными концами Неподвижны. Спор нет. Жгутиков нет. Образует капсулу, пили.
Cлайд 6
Cлайд 7
Культуральные свойства Оптимальная t культивирования 37°С при рН 7,2. Не растет на простых питательных средах, культивируется на картофельно-глицериновом агаре и на полусинтетическом казеиново-угольном агаре без добавления крови. Рост Bordetella pertussis на агаре Борде-Жангу
Cлайд 8
На кровяных средах образует зону гемолиза. Колонии мелкие, круглые, с ровными краями, блестящие напоминающие капельки ртути или зерна жемчуга. Тип дыхания Строгие аэробы Биохимические свойства: Хемоорганотрофы Метаболизм только окислительный Ферментативно малоактивны: не ферментируют углеводы, нет протеолитической активности, не восстанавливает нитраты
Cлайд 9
Резистентность. Очень неустойчив во внешней среде. Быстро разрушается под действием дезинфектантов, антисептиков , чувствительны к солнечному излучению. При 50-55°С погибают за 30 мин., при кипячении мгновенно. Антигенные свойства. О-Аг К-Аг, состоящий из 14 компонентов (агглютиногены). 7 компонент - общий для всех бордетелл Обязательными для B.pertussis являются 1 и 7 компоненты.
Cлайд 10
Ведущими для B. pertussis являются 1, 2, 3. В зависимости от Аг сочетаний различают 6 сероваров возбудителя (1.2.0; 1.0.3; 1.2.3 , 1.0.0…). В последнее десятилетие преобладающими являются серовары 1.2.0 и 1.0.3, выделяющиеся от привитых детей, имеющих легкие и атипичные формы заболевания. В то же время серовары 1.2.3 выделяются от непривитых детей прежде всего раннего возраста, у которых болезнь протекает чаще в тяжелой и реже — в среднетяжелой форме.
Cлайд 11
Факторы патогенности В.рertussis Бактериальные компоненты функции В составе ацеллюлярной вакцины Филаментозный гемагглютинин Адгезия, иммуносупрессивная активность да Пертактин адгезия да Фимбрии адгезия да тип 2 и 3 Коклюшный токсин Катализирует АДФ-рибозилирование G -белка да, анатоксин
Cлайд 12
Аденилатциклаза Цитотоксин (синтез цАМФ нарушает функционирование клетки. Противовоспалительный эффект за счет действия на клетки иммунной системы. нет Дерматонекротический токсин Активирует ГТФ-связывающий белок Rho, что ведет к нарушению цитоскеклета Нет
Cлайд 13
Трахеальный фактор колонизации Адгезия? Нет Трахеальный цитотоксин Цитотоксин, участвует в повреждении респираторного эпителия Нет Липополисахарид (эндотоксин) Провоспалительная активность, обеспечивает устойчивость к защитным механизмам Нет
Cлайд 14
Cлайд 15
Адгезия Филаментозный гемагглютинин -крупный белок, образующий филаментозные структуры на поверхности бактериальной клетки Обеспечивает адгезию, связываясь с галактозными остатками сульфогликолипида на поверхности ресничного эпителия
Cлайд 16
Агглютиногены тесно связаны с белками фимбрий Иммунизация фимбриальными белками защищает от аэрозольного заражения Различия в структуре фимбриальных белков позволяют м/о избежать воздействия ат Пертактин и ряд других поверхностных белков участвуют в адгезии, взаимодействуя с белками-рецепторами из семейства интегринов на поверхности клеток человека Белок BrkA (Bordetella resistance to killing) участвует в адгезии, инвазии и обеспечивает устойчивость бактерии к классическому комплемент-зависимому пути элиминации антигенов
Cлайд 17
Синергизм филаментного гемагглютинина и коклюшного токсина в процессе адгезии на клетках реснитчатого эпителия (цилиарный стаз)
Cлайд 18
Колонизация Наиболее изучена роль гемагглютинина, показано, что мутации, меняющие его структуру, приводят к снижению способности бордетелл колонизировать эпителий дыхательного тракта Большая роль принадлежит коклюшному токсину, ат против его компонентов также предотвращают колонизацию ресничного эпителия
Cлайд 19
Колонизация эпителия трахеи Bordetella pertussis (клетки без ресничек свободны от бактерий)
Cлайд 20
Токсины Bordetella pertussis Аденилатциклаза – единый полипептид , который может быть связан с клеткой и выделяться в окружающую среду Состоит из двух субъединиц: отвечающей за ферментативную активность и за связывание с рецепторами клеток Впервые был обнаружен как гемолизин Активен только в клетках эукариот Накопление цАМФ нарушает структру и физиологию клетки (аналогичен токсину В. anthracis)
Cлайд 21
Приводит к накоплению нейтрофилов в жидкости и снижению количества альвеолярных макрофагов в результате их апоптоза Играет роль на начальном этапе развития инфекции Мутанты по аденилатциклазе могут колонизировать слизистую, но обладают сниженной вирулентностью
Cлайд 22
Дерматонекротический токсин В пораженных клетках развивается ряд характерных явлений: складчатость мембраны, фокальная адгезия и напряженные актиновые волокна, а также ДНК-репликация без клеточного деления гомологичен цитотоксину E.coli Роль в патогенезе коклюша неясна
Cлайд 23
Трахеальный цитотоксин - фрагмент пептидогликана клеточной стенки Повреждает ресничный эпителий и вызывает цилиостаз – нарушается отток слизи и создаются условия для персистирования возбудителя Стимулирует продукцию ИЛ-1, в ответ на который синтезируется оксид азота Обладает таким свойством, как пирогенность
Cлайд 24
Липополисахарид Отличается от ЛПС энтеробактерий липид определяет биологическую активность(пирогенность, токсичность, адъювантность, стимуляцию продукции ИЛ-1) В целом, ЛПС обладает иммуногенностью С ним связывают реактогенность цельноклеточной коклюшной вакцины вакцины
Cлайд 25
Коклюшный токсин Опосредует как стадию колонизации, так и токсемическую стадию - белок с АВ5 структурой: Участок В – 5 субъединиц S2- S5, отвечает за связывание с рецепторами клеток-мишеней участок А соответствует субъединице S1, обладает ферментативной активностью – осуществляет АДФ-рибозилирование G-белка, ингибирующего в норме аденилатциклазу
Cлайд 26
Накопление цАМФ приводит к: Подавлению всех стадий фагоцитоза, Нарушению нормального расселения лимфоцитов(«хоуминг-эффект»), Опустошению тимус-зависимых зон лимфоидной ткани, Действует на клетки поджелудочной железы, вызывая гиперпродукцию инсулина и как следствие-гипогликемию Усиливает чувствительность к гистамину (в результате увеличение проницаемости капилляров, гипотензия, шок
Cлайд 27
У современных штаммов B.pertussis произошли существенные изменения в структуре ptxA гена, кодирующего S1 субъединицу коклюшного токсина, prn гена, кодирующего пертактин, и в фимбриальном fim3 гене, кодирующем Fim3 белок. Штаммы B.pertussis, характеризующиеся новыми «невакцинными» аллелями генов патогенности, обладают высокой степенью вирулентности Эти штаммы полностью вытеснили "старые" штаммы.
Cлайд 28
Cлайд 29
Патогенез коклюша контакт, внедрение, распространение. Заболевания - энцефалопатия, ринорея, пароксизмальный кашель, лимфоцитоз, бронхопневмония Осложнения: пневмония, ателектаз, эмфизема, кровоизлияние в мозг
Cлайд 30
Коклюш - высококонтагиозное заболевание, к которому очень восприимчивы дети (у взрослых вызывает затяжной бронхит) Источник инфекции – больной (заразен до 25-30дн) или бактерионоситель Путь передачи - воздушно-капельный Периоды заболевания: инкубационный(5-8дн, до14) катаральный (5-14дней) Судорожный (пароксизмальный) (2-8 недель) период разрешения (2-4 недели) ЛЕЧЕНИЕ: симптоматическое; антибиотикотерапия показана до пароксизмального периода; Ig
Cлайд 31
Лабораторная диагностика коклюша Основные методы лабораторной диагностики коклюша бактериологический и серологический
Cлайд 32
Бактериологический метод Клинический материал собирают - сухим тампоном с задней стенки глотки и делают посев на питательные среды - методом кашлевых пластинок Материал целесообразно получать до начала антимикробной терапии Необходимо соблюдение асептики, не следует допускать контаминации посторонней микрофлорой
Cлайд 33
Один из способов взятия клинического материала
Cлайд 34
Цель бактериологического исследования: Выделение чистой культуры и идентификация возбудителя коклюша Дифференциальный анализ культуральных свойств возбудителей коклюша (B.pertussis) и паракоклюша (B.parapertussis) 1 этап: Посев на следующие питательные среды: картофельно-глицериновый агар Борде, казеиновый-угольный агар, кровяной агар 2 этап: Палочки коклюша через 48-72ч роста образуют мелкие блестящие колонии серого цвета Паракоклюшные палочки через 24-48ч роста образуют колонии несколько крупнее Бактериологический метод
Cлайд 35
3 этап: Серологиеская идентификация бордетелл Используют образцы антигенов - с 1 по 14 Антиген 7 определяет род Bordetella, Антиген 1 определяет Bordetella pertussis, Антиген 14 – B.parapertussis В реакции агглютинации в пробирках
Cлайд 36
Серологический метод диагностики коклюша ИФА используют для определения sIgA в носоглоточной слизи, начиная с 2-3 недели заболевания РНГА используют при анализе сывороток через 10-14 дней, диагностический титр 1:80, у здоровых детей 1:20 РСК в парных сыворотках
Cлайд 37
Динамика образования антител при коклюше
Cлайд 38
Плановая профилактика коклюша Комбинированная вакцина АКДС (адсорбированная коклюшно –дифтерийно – столбнячная вакцина) включает дифтерийный и столбнячный анатоксины, а также убитые цельные микроорганизмы - возбудители коклюша